1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文 献 综 述一、前言腺苷酸环化酶(adenyl cyclase,ac)是一种膜整合蛋白[1],是第二信使camp(3'-5'-cyclic adenosine monophosphate) 信号通路,(即ras-camp信号通路)的关键酶。
腺苷酸环化酶可将细胞外信号转化为对细胞内受体的结合,催化三磷酸腺苷(atp)转化为环腺苷-3',5'-一磷酸与焦磷酸,通过改变细胞内camp的水平变化,达到调控细胞的生长发育、增殖、分化的效果,camp 广泛参于细胞代谢活动, 包括离子通透、肌肉收缩、激素分泌等。
通过研究发现,在离体条件下,外源性camp及其衍生物可模拟激素效应[2]。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
研究问题:天然产生camp的微生物效率过低,且当下用基因工程菌构建ac酶来提高camp水平对生产环境有一定的要求,导致酶法生产camp在工业应用上受限。
同时重组蛋白在大肠杆菌内由于缺少真核生物中翻译后修饰所需的酶类,或缺乏蛋白折叠过程中需要的某些酶和辅助,致使中间体大量积聚,容易形成包含体沉淀,增加了工作难度和生产成本。
我们旨在利用基因工程菌并结合大肠杆菌分泌表达ac酶的方法,简化分离提纯酶的步骤,提升酶法产camp的效率。
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