ATP 硫酸化酶的融合设计及其在大肠杆菌中的表达优化研究开题报告

 2023-07-05 11:07

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述一、引言硫是植物和动物生长所必需的矿物质营养素,其还原形式被并入含硫氨基酸、其他含硫代谢物和辅酶。

氧化后,它被并入到叶绿体膜的主要成分硫类物质中。

无论是植物还是微生物,都需要通过特定的转运体主动吸收硫酸盐,然后还原成硫化物。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

实验内容:1. ATP硫酸化酶基因优化合成2. 原核表达ATP硫酸化酶的质粒构建3. ATP硫酸化酶的纯化4. ATP硫酸化酶的酶学性质表征实验要求:1. 寻找到最适合进行原核表达的ATP硫酸化酶基因,对基因进行密码子优化,以便进行原核表达2. 选择合适的原核可溶表达策略,构建质粒并表达3. 采用合适的方式对ATP硫酸化酶进行纯化,得到纯度的重组酶4. 对酶活、酶活回收率、比活等酶活参数进行测定,并初步探究最适反应温度和pH

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