绿盲蝽乙酰胆碱酯酶基因（A216S）田间突变频率的检测开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一 、课题的意义

本课题来源于国家公益性农业行业科研专项长江流域盲蝽蟓可持续治理技术的研究与示范。

乙酰胆碱酯酶1（ache1)基因上a216s突变是引起绿盲蝽对毒死蜱产生抗性的主要原因。本研究利用pcr产物直接测序法检测绿盲蝽田间种群ace1基因a216s的突变，研究结果可明确a216s的突变频率与田间毒死蜱抗性的相关性，并为绿盲蝽毒死蜱抗性的早期预警提供技术参考。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

监测绿盲蝽田间种群对毒死蜱的抗性水平，同时检测绿盲蝽ace1基因序列上的a216s突变，以期明确a216s突变频率与毒死蜱抗性水平的相关性。

关键问题：pcr产物直接测序法检测基因突变

3. 研究的方法与方案

一、乙酰胆碱酯酶基因频率的测定

1.利用trizol提取试剂盒提取田间种群绿盲蝽总rna。

2.rna质量检测

4. 研究创新点

通过检测田间绿盲蝽种群ace1基因序列上A216S的突变频率，及田间种群对毒死蜱的抗性监测，明确在田间该突变与毒死蜱抗性水平的相关性。

5. 研究计划与进展

1. 2015年6月2015年9月，完成绿盲蝽田间种群的采集。

2. 2015年10月-2015年11月，完成对绿盲蝽田间种群ace1基因序列上a216s的突变频率的检测, 对绿盲蝽田间种群对毒死蜱抗性检测

3. 2015年12月2016年4月，整理数据、撰写论文、毕业答辩.