来源于Thermotoga thermarum甘油脱氢酶的克隆表达及其定性开题报告

1. 本选题研究的目的及意义

甘油脱氢酶（glyceroldehydrogenase，gdh，ec1.1.1.6）是一种氧化还原酶，能够催化甘油氧化为二羟基丙酮，同时伴随着辅酶nad 还原为nadh。

甘油脱氢酶广泛存在于微生物、植物和动物体内，并在细胞代谢、能量平衡和渗透压调节等方面发挥着重要作用。

近年来，随着生物技术和酶工程的快速发展，甘油脱氢酶作为一种重要的工业酶制剂，在生物医药、食品工业、精细化工和生物传感器等领域展现出巨大的应用潜力。

2. 本选题国内外研究状况综述

甘油脱氢酶的研究一直是国内外学者关注的热点。

近年来，随着分子生物学和生物信息学技术的快速发展，甘油脱氢酶的研究取得了显著进展。

国内研究现状：国内学者在甘油脱氢酶的克隆表达、酶学性质、催化机制和应用等方面开展了一系列研究工作。

3. 本选题研究的主要内容及写作提纲

1. 主要内容

1.从thermotogathermarum中克隆甘油脱氢酶基因(gdh)。

2.构建重组表达载体，并在escherichiacoli中表达gdh基因。

4. 研究的方法与步骤

本研究将采用基因工程、蛋白质工程和酶学等技术手段，以期实现来源于thermotogathermarum的甘油脱氢酶基因的克隆表达及其定性。

具体研究方法和步骤如下：
1.基因克隆：根据已发表的thermotogathermarum甘油脱氢酶基因序列设计引物，以thermotogathermarum基因组dna为模板进行pcr扩增，获得目的基因片段。

2.表达载体构建：将pcr扩增获得的目的基因片段连接到表达载体pet-28a( )上，构建重组表达质粒。

5. 研究的创新点

1.首次对来源于Thermotogathermarum的甘油脱氢酶进行克隆表达和酶学性质研究，为开发利用高温稳定性甘油脱氢酶提供新的基因资源。

2.通过对重组甘油脱氢酶进行酶学性质研究，为其在生物医药、食品工业等领域的应用提供理论依据和技术支持。

6. 计划与进度安排

第一阶段 （2024.12~2024.1）确认选题，了解毕业论文的相关步骤。

第二阶段（2024.1~2024.2）查询阅读相关文献，列出提纲

第三阶段（2024.2~2024.3）查询资料，学习相关论文

7. 参考文献（20个中文5个英文）

[1] 刘晓丽, 李宁, 张博润, 等. 高温菌来源的β-半乳糖苷酶的研究进展[j]. 食品与发酵工业, 2021, 47(14): 278-285.

[2] 黄丹, 王丽, 薛业敏, 等. 耐热β-葡萄糖苷酶的研究进展[j]. 中国食品学报, 2021, 21(3): 271-280.

[3] 张蕾, 王亚峰, 吴敬. 海洋来源耐热木聚糖酶的研究进展[j]. 食品工业科技, 2021, 42(17): 373-380.