枯草芽孢杆菌comER突变体的构建及其游动性研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

土壤枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis ）属于能够形成芽孢的革兰氏阳性菌[1] ，并且能作为生防制剂防治由植物病原细菌、真菌以及寄生虫引起的植物病害[2]。

因此，他给农业生产带来了巨大的经济效率。

目前，对于在不同物种芽孢杆菌的生防作用机理已经得到充分研究[3]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：本实验研究comer基因对枯草芽孢杆菌的生物膜、芽孢形成、游动性的影响,通过测定枯草芽孢杆菌及其生防能力相关基因突变体的生长曲线、在番茄根围的定殖能力，对番茄的促生能力，筛选其与生长相关的基因，以及调控生物防治、促进植物生长等功能相关基因。

研究内容：（1）枯草芽孢杆菌基因突变体构建；（2）游动性能力检测；（3）生防菌定殖能力检测。

拟解决的关键问题：（1）comer 对游动性功能的保守性研究（2）comer 的调控途径的分析（3）比较野生型和突变体生防菌的定殖能力

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案：1.菌株及培养本研究中使用的枯草芽孢杆菌为sm21,使用的培养基主要为：细菌生长培养基lb、 mc，培养温度为37℃。

需使用的抗生素及相应终浓度为：100 μg ml-1壮观霉素 （spectinomycin）。

mc（10 x ）：14.036 g k2hpo4.3h2o，5.239 g kh2po4，20 g 葡萄糖，1 g casein， 2 g 谷氨酸钾盐，1 ml 300 mm 柠檬酸三钠，1 ml 22 mg/ml 柠檬酸铁胺。

4. 研究创新点

本研究主要集中于研究comer在多细胞行为中的作用。

以前的预测结果显示在枯草芽孢杆菌中comer 和感受态细胞的形成有关 。

comer蛋白是吡咯啉-5-羧酸酯还原酶，涉及到脯氨酸生物合成代谢最后一步。

5. 研究计划与进展

2015.9-2015.10 学习掌握分子生物学技术2015.11-2015.12构建枯草芽孢杆菌△ComER菌株2016.1-2016.2构建枯草芽孢杆菌amy::lacz-ComER菌株2016.3-2016.4△ComER菌株、amy::lacz-ComER菌株游动性检测及温室定殖试验2016.5-2016.6撰写毕业论文及文章