一例规模化猪场腹泻病因探究开题报告

 2023-02-15 10:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)本课题的意义:2017年9月份江苏某猪场发生新生仔猪流行性腹泻,为了探究造成腹泻流行的病原,以提供更准确的治疗依据,减少经济损失,故开展此课题。

为了诊断此次仔猪腹泻病情,我们进行此次课题。

腹泻的病因有多种,如猪流行性腹泻、传染性胃肠炎、轮状病毒感染、仔猪大肠杆菌病、猪梭菌性肠炎、猪痢疾、沙门氏菌、增生性回肠炎等,虽然都引起腹泻,但每个疾病有其特点。

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2. 研究的基本内容和问题

目标在于分析2017年江苏省某地区猪流行性腹泻病毒((ped v)流行株的遗传变异情况,从而发现此地区pedv的优势流行毒株。

研究的主要内容是采取江苏省盐城市某发生群体腹泻猪场96头仔猪的粪便样品,通过实验室pcr诊断及基因测序技术,对腹泻仔猪的粪便样品分别进行流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒和轮状病毒的分子生物学检测。

并通过基因测序比对技术了解其遗传变异情况。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:(一)病料处理取适量粪便样品,于灭菌研磨器充分研磨,用 pbs液按照 1:5 稀释成均匀乳剂,反复冻融 3 次。

(二)pcr 鉴定及序列分析1、 rna 的抽提(1)取700ul研磨液12000r/min 2min(2)吸取500ul上清液,加700ultrizol(3)剧烈震荡,静置5-15min,充分反应(4)加氯仿50ul,剧烈震荡,静置5min;(5)离心:12000r/min ,4℃离心15min;(6)小心吸取200ul上层含有rna的水相。

(7)加等体积异丙醇,-20℃至少作用1 h以沉淀rna(8)12000r/min 4℃离心15min后,弃上清;加入1ml75%乙醇,洗涤rna沉淀。

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4. 研究创新点

特色或创新之处近年来,PED在我国流行愈来愈广,关于PED的研究相对较少,并且PEDV的毒株遗传变异速度快,此次实验对江苏海堤某猪场的流行性腹泻进行遗传变异分析。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展1、 采样2017.92017.102、试验阶段(RNA 的抽提 RT-PCR 操作电泳 )2017.112018.33、测序比对 2018.44、结果分析 讨论及撰写论文 2018.5

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