某规模化猪场保育猪猪伪狂犬检测及其原因分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义：猪伪狂犬（porcine pseudorabies）是由伪狂犬病病毒感染引起的一种急性传染病[1]。

对于不同日龄的猪，prv感染猪表现的临床症状也不相同，猪感染prv主要以呼吸、生殖和神经系统为特征症状，成年猪多为隐性感染，能长期带毒排毒；妊娠母猪50%可发生流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍；无母源抗体的新生仔猪通常出现发热、呕吐、衰竭或明显的神经症状，死亡率高，可达100%[2]。

伪狂犬病毒（pseudorabies virus,prv）属于疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科，病毒粒子呈球形或椭圆形，有囊膜，直径为150～180nm[1]。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标：某规模化猪场保育猪猪伪狂犬的检测和原因分析。

通过gb-elisa和ge-elisa的方法检测保育猪血清抗体，了解该猪场保育猪伪狂犬的抗体水平和野毒感染情况，从而对结果进行分析，对猪场提出可行的建议。

内容：1、对该猪场三个单元的保育猪整体状况的观察；2、对该猪场三个单元的保育猪伪狂犬疫苗的免疫情况调查；3、结合产房仔猪、妊娠舍母猪的临床症状进行综合分析；4、采取三个单元保育猪的血样进行gb-elisa和ge-elisa抗体检测（第一单元9个舍、第二、三单元各12个舍，总计33个猪舍，每个猪舍随机采取30个血样，总计990个血样）；5、对结果进行分析，提出可行建议。

3. 研究的方法与方案

研究方法：1、通过在保育猪舍观察猪的整体状况（精神状态、采食量、排便量、被毛皮肤光泽、步态等）；2、通过对免疫程序表、技术员的免疫过程和疫苗的种类调查，初步判断猪群伪狂犬的免疫状况；3、结合产房初生仔猪及妊娠舍母猪的临床表现，初步了解该猪场伪狂犬病的流行情况；4、通过gb-elisa和ge-elisa的方法检测血清抗体，了解保育猪伪狂犬的抗体水平和野毒感染率；5、对结果进行分析，分析其原因，并对控制和净化伪狂犬病提出建议。

技术路线：猪场调查：猪场保育猪整体状况观察猪伪狂犬免疫状况的调查 初生仔猪及妊娠母猪观察血清学检测 gb-elisa和ge-elisa抗体检测：包被抗原、设立对照和加样品、保温静置、洗涤三次后拍干、加酶标二抗、保温静置、洗涤三次后 血清学检测拍干、加显色剂（避光10min）、加终止液、测定od650、统计结果实验方案：1、实验目的：通过gb-elisa和ge-elisa的方法检测保育猪血清抗体，初步了解其保育猪伪狂犬的抗体水平和野毒感染率，结合妊娠猪和初生仔猪的临床症状，分析产生此结果的原因，并为此猪场提出控制和净化伪狂犬的建议。

2、实验原理：该猪场使用的是ge基因缺失苗（海博莱），保育猪通过免疫应答会产生针gb糖蛋白的抗体，而不会产生针对ge糖蛋白的抗体，通过gb-elisa可以检测猪血清中抗体的水平，通过ge-elisa可以检测猪群中有无野毒感染。

4. 研究创新点

特色或创新之处通过gB-ELisa和gE-ELisa的方法检测保育猪血清抗体，了解该猪场保育猪伪狂犬的抗体水平和野毒感染情况，并结合妊娠母猪和初生仔猪的临床症状，对结果进行分析，对该猪场控制和净化伪狂犬提出建议。

间接ELisa检测抗体水平的方法具有快速、灵敏、简便、特异性强、载体易于标准化等优点，同时价格相对廉价，适合基层猪场大范围的推广应用。

5. 研究计划与进展

2017年10月～11月中旬 猪场实习，了解猪场环境及日常工作，便于实验开展。

查阅文献，熟悉相关实验操作及流程，为后期试验做准备；2017年11月中旬月至12月上旬 采取样品，实验室检测；2017年12月～2018年 查阅文献，撰写毕业论文