胡萝卜软腐果胶杆菌巴西亚种hfq基因致病相关功能分析开题报告

 2023-02-18 10:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题意义:

马铃薯在植物分类学上属于茄科,是世界粮食作物四大主体之一,具有广泛的实用价值与研究意义。中国是世界马铃薯总产量最多的国家,其主要是用于鲜食菜用、淀粉原料、饲料原料等。马铃薯黑胫病属于细菌性病害,危害极大,该病严重影响了马铃薯的生产与效益。[1]马铃薯黑胫病的病原为欧文氏菌属马铃薯黑胫亚种(erwinia carolovora subsp.atroseplica),种薯从发芽到收获的整个生长过程中任何时期都有可能发病,对马铃薯的生产收获以及品质等造成了严重影响。[2]

马铃薯黑胫病主要侵染茎或薯块,自发芽开始,整个生长期的任何时期都有可能发病。当幼苗生长到15~ 20cm症状初现,具体表现为植株生长矮小,叶片上卷,节间短缩,绿色逐步褪去变为黄色,茎基部以上组织腐烂变黑,直至菱蔫而死。由于潜伏于马铃薯种薯中肉眼无法观察到的潜伏性侵染,这种潜伏侵染逐代累积逐渐表现症状造成危害,导致马铃薯黑胫病无法根除。[3]马铃薯黑胫杆菌只有通过伤口病菌才可侵入寄主,因此用刀切种薯是扩大病害传播的主要途径,在生产实践中常因刀切种薯造成黑胫病的大肆发生,而无伤口或已木栓化的薯块不受侵染。若把带菌种薯播种到大田里,并在适宜的温度、湿度等环境下,病菌会沿维管束侵染马铃薯块茎的幼芽,在植株整个生长过程中,一步步侵入植株根、茎、匍匐茎和新结块茎,并且沿着维管束向四周扩散,随后侵入附近薄壁组织的细胞间隙,靠着分泌一些果胶酶来溶解细胞壁的中胶层,最终使细胞离析,组织被解体,变为腐烂状。[4]所以为了减少种薯带病导致大范围发病的现象,对马铃薯黑胫病种薯的病原菌的研究变得尤为重要。

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2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

研究的目标:

对全局调控因子hfq的功能进行研究,揭示其对马铃薯黑胫果胶杆菌致病能力的影响。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:

(1)利用双交换同源重组的方法对马铃薯黑胫果胶杆菌中的hfq基因进行基因敲除。

(2)对得到的hfq缺失突变体进行致病性检测、细胞壁降解酶活性检测、生长速率测定、游动性及沉降性检测、生物膜形成能力检测及寄主植物胼胝质沉积的检测等一系列的实验来对hfq的致病相关功能进行分析。

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4. 研究创新点

5. 研究计划与进展

完成本设计的工作计划及进度安排

2018年5月10日-2018年5月26日 查阅有关资料,写出开题报告

2018年5月27日-2018年6月11日 方案论证,确定方案,准备着手实验

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