高产壳聚糖酶菌株的的发酵条件优化与酶学性质研究开题报告

1. 研究目的与意义

1.1研究背景

壳寡糖是一种多糖，具有广泛应用价值。传统工业生产壳寡糖，大多使用浓酸浓碱，污染环境。但通过酶促反应降解壳聚糖制备壳寡糖具有反应条件温和、产物均一、无污染的特点，是一种具有研究和应用价值的壳寡糖生产方法。本研究筛选到一株产壳聚糖酶活性较高的真菌，优化了该菌的产酶条件，初步研究了该壳聚糖酶的酶学性质，为后续发酵法生产壳聚糖酶以及壳寡糖打下基础。

1.2研究目的

2. 研究内容和预期目标

2.1主要研究内容

本实验在实验室前期研究的基础上，对实验室已筛选的菌株进行its序列的测定、进一步优化摇瓶发酵参数，对所产壳聚糖酶进行初步的分离纯化，研究其酶学性质，为以后工业放大生产提供理论依据。本文主要研究对高产壳聚糖酶菌株的的发酵条件优化壳聚糖酶的纯化和分子量的确定；纯化后酶学性质的初步研究；

2.2内容要求

3. 研究的方法与步骤

3.1高产壳聚糖酶菌株的初筛

在250ml锥形瓶中加入45 ml无菌去离子水并加入5g土样，在锥形瓶中放入5颗玻璃珠，在170 r/min、30℃的摇床中放置30min。将样品混合均匀后进行梯度稀释(10-1～10-5)，选取10-4、10-5稀释度的样液，各取0.2 ml涂布在初筛平板上，将平板置于30℃恒温培养箱中培养6～7天。挑选具有壳聚糖水解透明圈且透明圈较大(通过比较每种菌落的直径及透明圈直径比来得出)的菌落于另一初筛平板上划线分离，得到单菌落。将获得的单菌落接种于pda斜面培养基中保存，以便以后使用。

3.2壳聚糖酶产生菌的复筛

4. 参考文献

[1]孙洪彦.从水虿中提取壳聚糖及壳聚糖系列产品的开发应用[d].济南市:山东师范大学,2015.

[2]任晓敏,杨锋,黄承都,等.壳聚糖的降解及其应用研究[j].大众科技,2018,20(5):30－33.

[3]原佳琪,梁爽,孙雅煊,等.壳寡糖的制备及生物活性研究进展[j].生命的化学,2019,39(4):759－765.

5. 计划与进度安排

1、第17周（22-23-1学期）-第2周（2024年12月27日--2024年3月6日）接受任务、查阅和翻译文献、撰写及完成开题报告

2、第3周-第4周（2024年3月7日--2024年3月20日）根据实验步骤进行菌种的发酵条件优化进行数据测定、记录。

3、第5周（2024年3月21日--2024年4月10日）收集实验结果，分析数据