1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
猪流感是由猪流感病毒（siv）引起的一种急性呼吸道传染病。
猪流感病毒为a型流感病毒。
流感病毒具有广泛的主谱，除感染人外，还能感染家禽、猪、马和猫等动物。
2. 研究的基本内容和问题
试验目标：制备ha1和可溶性的m1重组蛋白，并且具备良好的抗原性，能大量表，为将来猪流感亚单位疫苗开发提供一定借鉴作用，为猪流感的诊断和防控提供一定指导作用。
主要内容：siv m1和ha1基因原核重组载体构建和蛋白表达。
1 原核重组载体构建1.1 引物的设计与合成 a/swine/guangdong/2006(h3n2)猪流感病毒m1基因的cds序列，利用 dnaman软件对所要表达基因cds序列进行同源性分析，选择高度同源的cds序列，采用primer premier5.0 软件设计引物，并在上游引物加入ecori，下游引物hindiii酶切位点目地片段 上游引物 下游引物 预期长度/bpm1 ccggaattcacgtatgttctct cccaagcttcacttgaatcg 7521.2 病毒rna提取按trlzol试剂盒使用说明书提取总rna1、将准备好的样品置于处理过的研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，如此反复，直至样品被磨为均匀白色粉末。
3. 研究的方法与方案
试验方法：原核重组载体构建；融合蛋白表达、纯化和鉴定实验方案：1 原核重组载体构建1.1 引物的设计与合成 a/swine/guangdong/2006(h3n2)猪流感病毒m1基因的cds序列，利用 dnaman软件对所要表达基因cds序列进行同源性分析，选择高度同源的cds序列，采用primer premier5.0 软件设计引物，并在上游引物加入ecori，下游引物hindiii酶切位点目地片段 上游引物 下游引物 预期长度/bpm1 ccggaattcacgtatgttctct cccaagcttcacttgaatcg 7521.2 病毒rna提取按trlzol试剂盒使用说明书提取总rna1、将准备好的样品置于处理过的研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，如此反复，直至样品被磨为均匀白色粉末。
2、按50~100mg组织/mltrizol的量加入trizol（注：trizol一定要足量），继续研磨2min左右。
3、室温静置至软化成红色溶液。
4. 研究创新点
蛋白以可溶性形式大量表达，WB鉴定抗原性良好。
5. 研究计划与进展
一、岗前培训：2015年8月31日到9月10日二、基础实验操作学习：2015年9月11日到10月20日三、原核重组载体构建：2015年10月25到11月25日四、重组载体蛋白表达：2015年12月1到12月25日五、论文撰写：2016年1月16到5月15日
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