高温季节日粮添加槲皮素对湖羊睾丸发育和生殖激素的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.1课题意义

中国南方夏季高温高湿的环境容易引起动物热应激。热应激是当机体或细胞处于高温环境中表现出的一系列非特异性反应的总和^[1]。热应激不仅对家畜血液指标和生理生化指标有影响，对公畜的繁殖性能的影响也十分显著^[2]。maurya等人^[3]研究证明在高温的条件下，温度会通过影响下丘脑-垂体-性腺轴影响畜禽的生殖激素分泌。热应激会降低公畜的精液品质，主要原因是睾丸的温度升高，当睾丸温度上升到一定值后就会出现异常情况，例如生殖上皮细胞变性，精子质量受影响等，若高温持续2到3周，畸形精子的数量就会增加^[4]。槲皮素是一种重要的黄酮类化合物，它具有广泛的药理作用，如抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗炎症和抗过敏等^[5]。现有研究表明在日粮中添加一定量的槲皮素能够缓解高温对畜禽的热应激作用。但目前，关于槲皮素对羊生殖机能影响的研究较少。本试验旨在研究高温条件下，饲粮中添加槲皮素对湖羊睾丸发育和生殖激素的影响，为槲皮素等植物源性抗氧化剂的应用提供科学依据，以便更好地指导实践生产。

1.2研究概况

2. 研究的基本内容和问题

2.1研究目标

明确日粮中添加槲皮素对湖羊睾丸发育和体内生殖激素含量的影响。

2.2研究内容

3. 研究的方法与方案

3.1研究方法与试验方案

3.1.1试验用槲皮素

槲皮素经南京农业大学采购处采购，密封保存备用。

3.1.2试验羊分组与样本采集

采用随机分组对照试验，在启东瑞鹏牧业有限公司湖羊场内，于2018年7月13日－2018年8月20日选择4月龄雄性湖羊作为试验羊。用磅秤对羊进行称重，按羊年龄、性别、体重等相等或相似原则，选择96只健康公羊随机分为2组即对照组和试验组，每组48只，每组又分为3栏，每栏16只。基础日粮相同，对照组不添加，试验组第一天在精料中添加184.34g槲皮素，之后每天增加1.44g。试验期35天。

槲皮素添加量：根据体重进行添加，每千克添加150mg槲皮素，试验羊分3栏，每栏16只，每只羊初始体重为25千克左右。

3.1.3饲料管理与日粮

试验湖羊为地面平养，小群单独舍饲，每组3栏，每栏16只羊，栏之间有砖墙和铁栅栏隔开，南北走向，屋顶为双面坡式，食槽为水泥槽，没有风扇、喷淋等降温措施。试验组和对照组每日饲喂2次精料，2次粗料，精粗分开饲喂，自由饮水。试验组第一天在精料中添加184.34g槲皮素，之后每天增加1.44g，拌于精料中分2次饲喂。每日的饲喂时间是：早上700-730，中午1530-1600。湖羊日粮由配方组成及营养见表1和表2。

饲喂时要注意环境安静，注意观察羊的采食情况，饲料调制新鲜干净，不得出现发霉变质，不得有铁丝、铁钉、塑料袋等异物。饲喂时间要充足，保证湖羊能够充分采食。

表1精料配方和营养成分

注：每公斤预混料中所含成分：维生素A 80KIU/kg，维生素D3 20KIU/kg，维生素E 200mg/kg，Fe640mg/kg，Mn 640mg/kg，Cu 120mg/kg，Zn 640mg/kg，Co 2.5mg/kg，I 10.5mg/kg，Se 2.5mg/kg， 烟酰胺 120mg/kg，Ca 8，P 2.5,NaCl 5，Mg 2.0，10水分。

表2粗料配方和营养成分

3.1.4测定指标

体重：试验羊分别在试验开始和试验结束时用磅秤测定空腹体重。平均日增重（阶段末期体重-阶段初期体重）/阶段饲养天数。

环境温湿度：每日900、1300、1700分别测定羊舍内南面、中间和北面的温湿度，及室外温湿度。计算温湿指数。

采集睾丸组织样品：采血结束后，对采血的试验羊进行睾丸阉割手术，采集睾丸组织样。

血液睾酮激素测定：上海信帆生物科技有限公司测定，采用放射免疫技术测定。

睾丸组织石蜡切片：将睾丸组织制作成石蜡切片并进行HE染色。观察试验组与对照组在睾丸组织形态上的差异。

3.1.5数据统计和分析

试验数据经Excel软件初步处理后，采用SPSS 20.0软件进行独立样本t检验，各组数据均以平均数±标准差表示。

4. 研究创新点

饲料添加剂是饲料中必不可少的，但一般的饲料添加剂多为抗生素、激素或者化学药品，大量使用会危害畜禽和人类的健康。所以植物提取物类饲料添加剂受到了广泛的关注。槲皮素广泛存在于植物中，现有研究证明槲皮素具有多种药理作用，其中抗氧化的作用最为重要。本试验的创新之处在于将植物源性槲皮素作为饲料添加剂用于湖羊日粮中，利用其抗氧化性探究其对湖羊生殖机能的影响。

5. 研究计划与进展

2018年5月-2018年7月查阅文献，实验设计和实验前准备；

2018年7月-2018年8月 湖羊饲养，样品建立阶段；

2018年9月-2019年2月 样品处理，指标测定；