利用果糖同时生产2-FL和D-阿洛酮糖的研究初探开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述1.1 研究背景人乳寡糖（human milk oligosaccharides，hmo）是母乳中非常独特的一类寡糖，大多由3～6个糖基组成，迄今已发现200多种。

hmo是母乳中含量第3的固形物（仅次于乳糖和脂肪），初乳中hmo含量为20～25 g/l，成熟母乳中含量为10～15 g/l[1-4]。

其中，2-fl是含量最多的一种hmo，可占母乳中hmo含量的30%，动物性乳液则不含此类物质。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1 研究内容为了建立利用果糖同时生产2'-fl和d-阿洛酮糖的规模化生产工艺，对基因工程重组大肠杆菌生产2'-fl和d-阿洛酮糖的生产工艺进行了研究和优化，主要包括利用差向异构酶催化果糖为d-阿洛酮糖的工艺；利用果糖和d-阿洛酮糖混合糖液发酵大肠杆菌制备2-fl和d-阿洛酮糖混合产物的工艺，优化上述工艺参数，达到提高产量、降低生产成本、提高生产效率、扩大经济效益的目标。

本课题主要研究内容是对重组大肠杆菌的发酵进行研究，以果糖为初始原料，经过酶催化、细胞工厂转化，同时生产出稀少单糖d-阿洛酮糖和人乳寡糖2'-岩藻糖基乳糖（2-fl）包括培养条件及工艺参数优化等。

2.2 研究流程2.2.1 实验材料（1）重组实验菌株：本实验室自主立构建重组大肠杆菌 bl21 /pcdfduet-1-g菌株，实验前分别以平板和甘油管的形式储存于 4℃和-70℃冰箱中。