菘蓝的生长与生物学特性参数对施氮次数的响应研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义：

菘蓝（isatis indigotica fort .）是十字花科植物根入药为板蓝根，叶入药为大青叶^[1] 是常用的抗病毒中药（lin et al.，2010）。临床配方中需求量比较大。广泛用于治疗如流感、腮腺炎、乙脑、肝炎等多种疾病。板蓝根中的（r,s）-告依春与大青叶中的靛玉红为其活性成分指标^[1]，靛玉红及其衍生物可用于治疗慢性粒细胞白血病 ^[2-3]。菘蓝叶片是临床上极其常用的中药之一，也是许多中成药的主要原料，如金青感冒颗粒、小儿退热颗粒、复方板蓝根颗粒等。现代以菘蓝叶片制成的靛玉红片内服，对治疗慢性粒细胞性白血病有较好疗效。

板蓝根具有抗病毒、抗活性氧、抗炎抗菌作用以及抗内毒素的作用^[4-7]，是公认的有较好抗病毒效果的中药之一。氮素影响着药用植物的生长发育，影响其初生和次生代谢途径，使其次生代谢产物的组成和含量有所不同，导致药材的品质发生变化^[8]。肖云华等^[9]研究表明，不同的氮素形态和浓度对菘蓝生物量和活性成分含量的影响存在很大差异，最佳施氮组合为(nh4)2so4浓度为7.5mmol/l，kno3浓度为2.5mmol/l，co(nh2)2为5.0mmol/l，菘蓝前期以促生长为主，经济有效的平衡施氮组合能合理促进菘蓝植株生长，提高大青叶的活性成分的含量和单株生物量。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

菘蓝（isatis indigotica fort .）是一位需求量大的药材源植物，本课题的研究通过测定菘蓝各生长指标和光和特性对施氮次数的动态响应，达到掌握菘蓝生长期最佳的施氮方案，以此来指导生产，使生产资源更高效合理的利用。

研究内容：

3. 研究的方法与方案

研究方法：

（1）生物量测定 每个处理随机采取5株，清洗干净，按地上部分（大青叶）、地下部分（板蓝根）两个部位分开，测主根直径、主根根长、侧根数。然后于105℃杀青15min，之后60℃烘干至恒重，称其干重，粉碎，大青叶过60目筛混合均匀后备用，板蓝根过100目筛混合均匀后备用。

（2）大青叶中靛蓝、靛玉红的测定 参照《中国药典》（2010版）高效液相色谱法测定大青叶中靛蓝、靛玉红的含量，略作修改。超高效液相色谱（uplc）条件：采用acclaim rslc120 c18 (3.0100mm, 2.2 μm)分析柱，以甲醇-水（71:29）为流动相；流速0.400mlmin^-1；柱温30℃；紫外线检测波长为289nm；进样体积5l。

4. 研究创新点

近年来针对氮素的研究主要集中在配比和形态对菘蓝的生长和生物学特性的影响，着重针对施氮次数对菘蓝生长和活性成分的影响比较少。本实验在南京农业大学唐晓清等前期研究的基础上，以菘蓝生长前期、后期最佳的氮素组合处理不同的次数，重点研究施肥次数对菘蓝生长及活性成分的影响，以探索施肥次数对菘蓝生长及活性成分的影响，探求最佳的施肥方案，不仅可以在实际的农业生产中提高氮肥的利用效率，同时可以增加药材有效成分的含量提高药材的质量，达到经济施氮的目的。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

本次实验预计整个实验时间为2014年5月到2015年2月份。