褐藻胶裂解酶的挖掘及酶活测定开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

褐藻胶裂解酶的研究进展摘要：褐藻胶是由β-d-甘露糖醛酸及其c5差向异构体α-l-古洛糖醛酸结合而成的线性高分子多糖，褐藻胶裂解酶能通过β-消去机制催化褐藻胶降解生成具有多种生物活性的褐藻寡糖，褐藻寡糖因其特有的生理活性和生化特性，日益受到人们的普遍关注。

本文从褐藻胶裂解酶的来源、分类、作用方式及机理、结构与功能、酶活测定、酶学性质、应用等方面作一综述，并对未来褐藻胶裂解酶的研究做出了展望。

关键词：褐藻胶；褐藻胶裂解酶；褐藻寡糖；褐藻胶存在于褐藻细胞壁及细胞间质中，是水溶性酸性阴离子多糖，由β-d-甘露糖醛酸（m）及其c5差向异构体α-l-古洛糖醛酸（g）通过1，4糖苷键以均聚或随机的方式排列，有三种聚合方式：聚古罗糖醛酸 (poly g)、聚甘露糖醛酸 (poly m)和异聚mg段 (poly mg)[1]，具有一些优秀的特点和性质[2]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本课题主要研究内容：褐藻胶裂解酶产生菌几乎都是从腐烂海带上分离筛选出来的，为了从多样的环境样本中寻找新的褐藻胶裂解酶，拟从土壤中进行野生型褐藻胶裂解酶高产菌株的筛选，从菌株中分离纯化海藻酸裂解酶。

随着测序技术的进步和测序成本的大幅度降低，利用高通量技术测定目标菌株的全基因组序列，构建含褐藻胶裂解酶基因的工程菌，对筛选出的酶基因克隆过表达，在为后续褐藻胶裂解酶酶学性质研究奠定基础的同时，也为褐藻胶裂解酶的开发利用提供了依据。

本实验以海藻酸钠为唯一碳源的培养基，对海边土壤中的微生物进行筛选和分离，获得海藻酸钠裂解酶高产菌株。