1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1. 研究意义
菘蓝isatis indigotica fort. 为十字花科菘蓝属二年生草本植物，以干燥根和叶入药，分别称板蓝根和大青叶，板蓝根具有清热解毒、凉血利咽的功效; 大青叶具有凉血消斑、清肝泻火、定惊的功效。是我国常用的抗病毒中药，临床配方中应用较多。
氮素既是植物最重要的结构物质，又是生理代谢中最活跃的物质。不同氮素水平及其氮素形态影响着植物碳代谢，碳代谢为氮代谢提供碳源和能量，而氮代谢又为碳代谢提供酶与光合色素，适当的施用氮肥能有效地促进植物的光合作用，促进作物的生长提高产量。氮肥施用是否合理直接影响作物的品质和生理代谢，但是氮素的过量施用也带来了严重的负面影响，如地下水硝酸盐的污染、土壤结构破坏等。因此提高植物对氮素的利用效率，减少氮肥对生态系统的污染有重要的意义。单用酰胺态氮对菘蓝生长与光合作用的影响研究较少，本试验为菘蓝栽培生产中有机氮的利用提供理论基础。
2. 研究的基本内容和问题
1. 研究目标
（1）通过用不同浓度酰胺态氮对菘蓝进行处理，初步了解不同浓度酰胺态氮对菘蓝生长的影响，为菘蓝的氮肥施用提供依据。
（2）采用定期采样的方法，在不同浓度酰胺态氮施用不同次数的条件下对菘蓝叶绿素含量、光合参数、生物学指标进行测定分析，探求酰胺态氮对菘蓝成分积累和气体交换参数的影响，为生产高含量菘蓝提供理论依据。
3. 研究的方法与方案
1. 研究方法
1.1 实验设计
试验设5个浓度，分别为0.0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%，以CK、T1、T2、T3、T4表示，各处理重复5次，随机排列，处理正常供给P、K。待播种材料出苗15 d后，开始浇营养液，每隔10 d浇1次基本营养液，每次1000 mL，直接浇至根部。播种85 d后开始叶面喷施处理液[CO(NH2)2]，之后间隔30d浇1次处理液，基本营养液于处理之间继续浇，7月26日处理A组，8月26日处理A与B组，9月26日处理A、B、C三组（即A组为处理3次，B组处理2次，C组处理1次），最后一次处理后第10d开始第一次采样，之后间隔15d采样一次，共采样4次。
1.2叶绿素含量的测定
采用SPAD502叶绿素测定仪，选取由内至外的第二轮功能叶片的中上部测定其SPAD值，记为叶绿素的相对含量。
1.3光合参数的测定
用LI-6400型光合仪于1000μmolm-2s-1光子强度下，测定同一位置菘蓝叶片的净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）和蒸腾速率（Tr）。
1.4菘蓝的生物学指标测定
用直尺测量其主根长度，用游标卡尺测量其主根中部直径，之后称量其叶片、根的重量。
2. 实验方案
2.1 实验材料
以山西栽培居群的菘蓝果实为试验材料，实验地设在南京农业大学园艺学院的塑料大棚内，采用盆栽方式，盆栽基质：蛭石与珍珠岩按2:1混合，2013年5月2日播种，适时间苗，选择长势一致的菘蓝幼苗，每盆8株。
基本营养液采用霍格兰营养液配方，pH 6.0，处理液为不同浓度的酰胺态氮，由纯脲
CO(NH2)2提供，磷、钾（P、K）由磷酸二氢钾KH2PO4提供，所用试剂为分析纯(AR)。
2.2 菘蓝的叶绿素含量的测定
在每一次采样的当天9:00~12:00选取由内至外的第二轮功能叶片的中上部测定其叶绿素含量并记录数据，每一个处理测定10张叶片，共测量4次。
2.3 菘蓝叶片的光合参数的测定
选取菘蓝植株由内至外的第二张功能叶片，测定同一位置菘蓝叶片的光合参数并记录数据，每一个处理测定10张叶片。
2.4 菘蓝的生物学指标测定
每个处理随机采取10株，清洗干净，擦干水分后，分别测量其主根长度、主根中部直径，称量其叶片、根的重量。
2.5 结果分析
根据实验数据，分析以不同浓度的酰胺态氮对菘蓝进行不同次数的处理对植物体叶绿素、植物生长与光合参数的影响，并找出其相关性、规律性。
3. 技术路线(见附件）
4. 可行性分析 4.1 客观条件：试验材料、实验室条件 （1）中药教学实验中心的栽培设施完备，通过盆栽方式培育幼苗并用不同浓度酰胺态氮处理不同次数来获取本实验需要的菘蓝幼苗； （2）中药教学实验中心的实验室在植物生理和中药质量分析等方面具有较好的实验和技术条件，具有SPAD502叶绿素测定仪、LI-6400型光合仪等必备的仪器设施，部分药品、试剂可直接从实验室获取，能满足实验的需求。 4.2 主观条件：指导教师、毕业论文小组成员 （1）毕业论文由长期从事菘蓝研究的专业导师指导，小组成员均为中药学专业学生，接受过较好的理论教育，对中药早有接触；且在实验之前查阅了大量的相关文献，制定了完备、可靠的实验方案，为实践操作做了充分的准备。 （2）组员有相关课程实验基础，还参加过创新性实验实践项目，仪器使用熟练，动手能力较强有一定的实验实践能力。 |
综上所述，本实验可行。
4. 研究创新点
目前关于菘蓝的研究主要集中在化学成分、药理活性、制剂工艺、临床应用及组织培养等方面，在菘蓝的栽培生产中，有关氮素营养的研究多涉及铵态氮与硝态氮不同比例、铵态氮硝态氮与酰胺态氮的不同组合对菘蓝生长及光合作用的影响。实际的栽培生产中，单用酰胺态氮对菘蓝生长及光合作用的影响尚未有报道。 植物获取氮素的方式有两种,根系吸收和叶面吸收。将氮肥施入土壤，可以供植物吸收利用，或随灌溉水、降水淋溶进入地下，或者经氨挥发、反硝化作用而挥发掉，易造成氮肥的大量损失。而叶面施肥具有养分吸收快，肥料利用率高，弥补根系养分吸收的不足，改善作物的营养环境，提高作物产量及品质等优点。为此，本试验通过叶面喷施不同浓度酰胺态氮研究对菘蓝苗期生长与气体交换参数的影响。 |
5. 研究计划与进展
研究计划
本研究预期在2013年4月2015年5月完成：
2013年4月2013年5月：进行前期工作，查找文献资料，完成研究方案的设计。
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