赤眼蜂的分子鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.1意义：赤眼蜂(trichogrammaspp.)是全世界害虫生物防治中研究最多、应用最广的一类卵寄生性天敌，广泛用于防治玉米、水稻、棉花、蔬菜以及森林害虫，在农业害虫防治的应用实践中，赤眼蜂蜂种的正确鉴别是取得良好防治效果的关键。

1.2国内外研究概况：赤眼蜂属分布遍及全球陆地生境,有关其种系发生目前知之甚少，自westwood在1833年描述的第一种赤眼蜂trichogrammaevanescenswestwood至1994年共有145种赤眼蜂被描述，到1999年为止，赤眼蜂属在全世界记录分布已有180多种,中国有记录种为29种，而在最近30年中描述新种近160多种，但由于赤眼蜂的个体微小，近缘种间缺乏可鉴的形态特征，单单依靠以形态特征来研究赤眼蜂属的分类与系统发育仍有许多未能解决的问题，近年来随着分子标记技术的发展，已有多种分子标记方法应用与赤眼蜂的系统分类与蜂种鉴定。

1.2.1国内研究概况

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标：赤眼蜂属个体微小,近缘种间形态难辨，本研究利用分子手段，通过mtdna-cytb基因设计特定引物对赤眼蜂进行蜂种鉴定。

内容：扩增赤眼蜂的mtdnacytb基因片段，利用cytb基因片段在ncbi网站的blast并确定蜂种，设计、筛选蜂种的特异性引物，利用分子标记方法鉴定赤眼蜂蜂种。

拟解决的关键问题：主要以桃园所采集的赤眼蜂为试材，基于mtdna基因测序和蜂种特异引物的设计与筛选等方法，研究重要赤眼蜂蜂种的分子鉴定。

3. 研究的方法与方案

研究方法：dna测序、引物设计及筛选

技术路线：赤眼蜂收集→赤眼蜂mtdna基因序列测定→确定用于赤眼蜂蜂种鉴定基因片段→蜂种特异性引物设计、筛选→赤眼蜂蜂种鉴定。

实验方案及可行性分析：赤眼蜂属个体微小，近缘种间形态难辨，线粒体dna(mtdna)具有分子量小，进化速率较快，遗传过程不发生基因重组、倒位、易位等突变，并且遵守严格的母系遗传方式等特点，使得它很适合于昆虫种群、近缘种的研究及种的鉴定。

4. 研究创新点

通过mtDNA-Cytb基因针对特种赤眼蜂设计特定引物，使得赤眼蜂的鉴定变得快速高效准确。

5. 研究计划与进展

（1）2015年4月-2015年9月，野外卵寄生蜂的采集。

（2）对桃园采集的64只赤眼蜂进行dna提取。

（3）利用昆虫线粒体mtdna的细胞色素氧化酶b(cytb)基因片段进行扩增，并对扩增产物进行测序。