对烟草中10个细胞膜受体蛋白抗疫霉菌作用的分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题意义：

疫霉菌属于卵菌门（oomycetes），是一大类具有破坏性的植物病原菌。此类病菌大多能诱发许多重要的植物病害，例如1845年前后致病疫霉在欧洲特别是爱尔兰造成马铃薯的绝产，造成了史上著名的爱尔兰饥馑，在饥荒中死亡和逃亡的爱尔兰人约有一百多万。由大豆疫霉菌引起的大豆疫霉根腐病是大豆生产上的毁灭性病害之一。其危害面积大、破坏程度重，在全球范围内每年造成的经济损失高达十几亿美元[1]。此外，疫霉还会引起水稻疫霉病、辣椒疫霉、芝麻疫霉等农作物的病害，在农业生产中造成极大的危害。

最近在疫霉菌中鉴定到一类新型病原相关分子模式xeg1可以被大豆烟草等植物识别，诱导一系列植物免疫反应。通过分析植物中的受体蛋白对xeg1的识别作用认识植物对疫霉菌的先天免疫机理、挖掘和利用植物广谱抗病资源具有重要的理论和实践作用。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

确定烟草中十个蛋白受体rlp对植物识别xeg1的作用和对疫霉菌的抗病作用。

研究内容： 对烟草中编码十个细胞膜蛋白受体rlp的基因进行沉默，确定xeg1在沉默的植株上反应以及沉默植株对疫霉菌抗感病症状。

3. 研究的方法与方案

研究方法：

通过基因克隆技术和烟草中的瞬时表达系统，克隆烟草的基因组，注射农杆菌，农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，产生基因沉默植株。然后对rlp基因沉默植株进行侵染，观察沉默了受体蛋白基因的植株对xeg1的反应以及对疫霉菌的抗性变化。过与正常植株的对比，观察侵染植物的症状，从而推测出细胞膜受体蛋白对xeg1的识别作用和对疫霉菌的抗病作用。通过研究烟草中十个细胞膜受体蛋白对疫霉菌所产生的xeg1的反应推测烟草对疫霉菌抗性的内在原理。

技术路线：

4. 研究创新点

特色与创新之处：

利用拟南芥与烟草的同源基因关系来确定对XEG1的识别起调节作用的细胞膜蛋白受体，缩小了实验的研究范围，大大缩小了实验的工作量。试验中每个步骤的严谨操作提高了实验的准确性和可行性。

5. 研究计划与进展

研究计划和预期进展：

2015年9月确定待分析的十个rlp基因，完成基因沉默载体的构建

2016年2月-3月完成剩下工作