转灰飞虱CYP353D1v2基因果蝇的生物测定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、 课题研究概况、意义、应用前景

1.1研究概况

灰飞虱laodelphaxstriatellus是亚洲稻区的一种重要昆虫。20世纪60年代以来,灰飞虱先后对有机 氯、有机磷以及氨基甲酸酯类杀虫剂产生了不同程度的抗药性,其抗性机理主要涉及皮层渗透速率下降、解毒代谢增强和靶标敏感性下降。

2. 研究的基本内容和问题

2、研究目标内容

通过毒力测定，得出对照组果蝇和转基因果蝇对各药剂的lc₅₀值，以确定cyp353d1v2基因与抗药性的关系。

实验果蝇成熟后，选择羽化后4天的直翅雌性果蝇 ，用微量点滴器进行毒力测定，得出对照组果蝇和转基因果蝇对各药剂的lc₅₀值，分析数据以确定cyp353d1v2基因与抗药性的关系。

3. 研究的方法与方案

3、研究方法及可行性分析

3.1研究方法

实验果蝇成虫后，选择羽化后4天的直翅雌性果蝇，用二氧化碳麻醉，然后用手动微量点滴器（使用体积为0.040μl）将药液点滴在试虫的前胸背板的正中间。每种药剂用丙酮稀释成5-6个浓度，每浓度处理20头，重复3次，用丙酮做对照。为了避免交叉污染，每换一种农药前，都要将注射器和针头用纯丙酮洗5-6次。点滴农药后的果蝇分类放在新鲜培养基瓶中，培养条件为：温度25℃，湿度60%-70%，白天16 h、黑暗8 h。本实验中我们采用果蝇留足抽搐或者果蝇静止但腹部朝上两者都作为果蝇死亡的标准，农药处理48 h后，准确记录实验果蝇的死亡数量。

4. 研究创新点

4、特色或创新之处

在验证解毒酶功能的体外表达系统中，解毒酶活性会受到多种因素的干扰，最终的检测结果并不能说明该蛋白没有相应的代谢活性。而本实验运用的转基因果蝇方法则能够弥补体外解毒酶表达系统的不足。

5. 研究计划与进展

5、研究计划及预期进展

5.1本实验从2015年7月开始，2015年9月结束。

5.2逐步进行毒死蜱，溴氰菊酯，吡虫啉，氟虫腈，阿维菌素，乙虫腈，灭多威的毒力测定。