1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
水稻白叶枯病是一种由水稻黄单胞菌水稻致病变种（xanthomonas oryzae pv. oryzae）引起的最具破坏性的水稻细菌病害。
类似转录激活子效应蛋白（tale）是xoo在侵染植物后通过三型分泌通道泌出的一类蛋白,此类蛋白可经细菌三型分泌系统进入植物细胞核，特异性结合到寄主基因启动子区，诱导寄主基因转录，使植物表现为抗病或感病，调控植株生理生化进程。
tal效应因子具有特定的结构特征，且序列相对保守。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：通过emsa方法确定tal4基因是否与预测的ebe发生互作。
研究内容：原核表达载体的构建，原核表达，蛋白和dna的互作三个部分。
拟解决的关键问题：了解ebe基因是否跟tal4蛋白发生互作。
3. 研究的方法与方案
研究方法：蛋白质印迹法（western blot）,聚丙烯酰氨凝胶电泳（sds-page）镍柱纯化蛋白技术，凝胶迁移实验（emsa）技术路线：一方面是先构建原核表达载体pet30b，将其转入大肠杆菌bl21中看其原核表达情况，再对目的蛋白进行his标签柱纯化,得到纯化后的tal4蛋白。
tal4蛋白经过透析，浓缩后用试剂盒测定其浓度；另一方面是对含有ebe基因的载体进行酶切获得ebe基因，再回收ebe基因。
最后一步则是检测纯化后的tal4与ebe是否发生互作。
4. 研究创新点
本课题的目的在于揭示细菌中的Tal4蛋白和菌中靶标基因的发生互作的情况。
两者均是在细菌之中，而不是研究细菌中蛋白和寄主中靶标基因的互作。
5. 研究计划与进展
2015.92015.10 载体的构建2015.10-2015.11 原核表达2015.11-2015.12 HIS标签柱纯化2015.12-2016.1Tal4蛋白的透析，浓缩，试剂盒测定其浓度；EBE基因的酶切，回收和与蛋白的互作
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