1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.1背景及意义：烟粉虱bemisia tabaci（gennadius）属同翅目homoptera、粉虱科aleyrodidae、小粉虱属bemisia，是热带和亚热带地区危害多种农作物、蔬菜和观赏植物的主要害虫之一。
根据其寄主范围、危害习性和传毒能力等方面的差异，烟粉虱可分为多种生物型，其中b型和q型是危害最为严重的两种生物型。
对烟粉虱的防治主要依赖化学防治，由于杀虫剂的大量使用，烟粉虱对有机磷、拟除虫菊酯、新烟碱类和昆虫生长调节剂等多种杀虫剂产生了抗药性。
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究目标及内容：收集新疆地区的不同烟粉虱吡虫啉抗性种群，提取RNA，进行反转录，设计引物，利用半定量PCR对新疆地区烟粉虱不同吡虫啉抗性种群的P450基因表达量进行分析，比较其与抗性水平之间的关系，研究其抗性分子机制，为其在新疆的化学防治及抗药性治理提供科学依据。
2.2拟解决的关键问题：通过半定量PCR初步筛选出过表达基因。
3. 研究的方法与方案
3.1研究方法：① 提取不同吡虫啉抗性种群烟粉虱的rna② 反转录制备dna模板③ 设计引物，利用primer5软件④ 利用半定量pcr技术分析烟粉虱不同吡虫啉抗性种群p450基因表达量3.2技术路线：采集新疆地区和田、伊犁、喀什、吐鲁番等地不同烟粉虱吡虫啉抗性种群→提取上述烟粉虱种群rna→反转录以制备dna模板→利用primer5软件设计引物，交由金斯瑞公司进行制备→利用半定量pcr技术进行分析，分析不同烟粉虱吡虫啉抗性种群的p450基因表达量→比较分析烟粉虱不同种群p450基因表达量与其抗性水平之间的关系3.3实验方案：半定量pcr具体方法：3.1.1前期准备 ①rna的提取 ②cdna的合成（模板） ③内参基因的确定（搜索相关文献）β-actin3.1.2 pcr循环数的摸索 ①内参基因β-actin的pcr循环数确定方法：在正规的实验操作中内参基因的循环数在25个循环左右，对此本实验操作设置五个循环梯度，23、24、25、26、27个循环，做三组重复。
pcr程序（25循环体系）：94℃3min 94℃30sec 54℃30sec（根据基因tm值确定） 72℃2min72℃5min4℃∞ ②其它基因的循环数摸索：本实验以cyp6cm1作为代表基因进行循环数摸索，方法同上（内参基因的）28、29、30、31、32个循环，做三组重复。
最终确定30个循环。
4. 研究创新点
本课题对新疆棉花代表性生产地区不同烟粉虱种群进行全面分析，揭示其抗吡虫啉分子机制。
5. 研究计划与进展
5.1研究计划：2015/9-2016/1①提取RNA，反转录制备模板，设计引物； ②半定量PCR技术分析和田、喀什、伊犁和吐鲁番等地棉区、蔬菜基地等不同烟粉虱吡虫啉抗性种群的P450基因表达量。
2016/2-2016/4 ①分析比较不同烟粉虱种群P450基因表达量与其抗性水平之间的关系；②利用定量PCR验证目标基因； ③课题总结报告，提交论文5.2预期进展： 2015年12月完成半定量PCR分析
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