1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
harpin是由革兰氏阴性植物病原细菌产生的一类蛋白质激发子,特点是对蛋白酶敏感, 热稳定,富含甘氨酸。
除了上述共同点外,来源不同菌的harpin蛋白在序列上几乎没有同源性,但在二级结构上,他们含有多个α螺旋[1]。
近20年来对来自于不同细菌的harpin蛋白有大量的研究,许多研究表明harpin蛋白作用于植物细胞胞外空间,不像植物病原细菌的其他效应因子作用于植物细胞核内, harpin蛋白有可能作为一个帮助物质进出细胞的转运子,该蛋白能在人工膜上具有结合脂质体病形成空洞的实验在一定程度上应征了该观点[1],这也帮助研究理解在酵母杂交中发现harpin蛋白能与多种细菌和植物的蛋白互作的现象(本实验室数据,未发表)。
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2. 研究的基本内容和问题
茉莉酸和乙烯在提高植物抗虫、抗病、抗逆性及生长发育中起重要调控作用。
茉莉酸能促进生根,增加不定根干重,提高水稻幼苗对低温(5-7℃,3d)和高温(46℃,24h)的抵抗力。
乙烯除了诱导抗病、抗虫性外,主要的生理效应是促进成熟,促进开花,促进根的生长、分化、不定根的形成等。
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3. 研究的方法与方案
表达harpin↓纯化harpin↓喷施15ug/ml的harpin↓RNA的提取↓RNA的质量检测↓ cDNA合成(去除基因组DNA→DNase失活→cDNA合成)↓ qPCR提取RNA使用Trizol法cDNA合成使用Takral试剂盒qPCR使用KAPA SYBR FAST qPCR Kit方案可行
4. 研究创新点
5. 研究计划与进展
2015.9.1-2015.12.1完成实验
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